猴脑线粒体DNA提取及限制性内切酶分析

本文用冷碱法从2只恒河猴和1只食蟹猴的脑组织中提取mtDNA，最后的得率大约为0.7ugmtDNA/g脑组织，是肝脏组织得率的1/3左右。与肝脏组织相比较，从脑组织中提取mtDNA有以下优点：1.匀浆方便。2.样品中蛋白杂质少，容易彻底抽提去除蛋白质。3.大分子RNA杂质极少，不经Sepharose-4B柱或Rnase处理，就可得到较纯的样品。加之哺乳动物脑的体积较大，哺乳动物脑组织不失为提取mtDNA的一个有用的组织来源。经16种限制性内切酶分析，并与来自同一个体肝脏组织的mtDNA比较，结果进一步证实，mtDNA无组织特异性。对12岁以上老年猴脑mtDNA的分析表明，在衰老中，动物mtDNA的序列可能没有变化，甲基化程度也无显著增高。