花粉管通道介导的抗除草剂基因（bar）对大豆的遗传转化
DOI: 10.3969/j.issn.1000-9841.2007.03.004
Keywords: 大豆 ,花粉管通道法 ,bar-基因 ,转化
Abstract:
采用花粉管通道介导法将含有bar基因的pPTN140质粒DNA导入8个黑龙江省大豆主栽品种（系），导入1384朵花，共获得1164粒种子，经2次Basta除草剂筛选后共获得3个品种的除草剂抗性植株8株。对其进行PCR以及PCR-Southern杂交检测均为阳性结果，Southern杂交结果显示，8个除草剂抗性后代植株整合数目不同，其中2株整合单拷贝基因，另外6株分别整合3~8个拷贝的bar基因。对8个抗性植株的后代进行了除草剂抗性分析，D1-D3代均出现除草剂抗性植株，表明bar基因可以在转基因植株后代中遗传，抗性遗传分析结果表明不同株系间以及株系内除草剂抗性缺乏规律性，分离比率不符合孟德尔遗传规律。说明大豆花粉管通道法转化基因存在多拷贝共抑制现象。目前获得除草剂抗性稳定的D3代株系82个。试验说明利用花粉管通道技术进行大豆转化是可行的。
References
[1] ［1］周光宇, 龚蓁蓁, 王自芳.远缘杂交的分子基础[J]遗传学报1979，6(4)：405-413. [2] 王才林，赵凌，宗寿余，等.用花粉管通道法将 bar基因导入水稻获得可遗传的转基因植株[J.江苏农业学报，2002，18(3)：129-133. [3] 黄骏麒,钱思颖，刘桂玲，等外源海岛棉DNA导致陆地棉性状的变异[J].遗传学报，1981，8(1)：56-62 [4] 雷勃钧，君光初，卢翠华，等.外源DNA直接导入大豆的研究[J].大豆科学，1991，10(1)：58-63. [5] 崔岩，杨庆凯，周思军.利用花粉管通道技术导入大豆抗病虫目的基因[J].生物技术，2002, (6)：5-7. [6] 丁群星，谢友菊，戴景瑞，等.用子房注射法将 Bt毒蛋白基因导入玉米的研究[J].中国科学（B辑），1993，23(7)：707-713. [7] 裴新梧，崔凯荣，孔英珍，等.导入高梁DNA选育丰产、抗逆小麦新品系及其RAPD分子验证[J].兰州大学学报(自然科学版)，1999，35(2)：130-135. [8] 刘德璞，李长有.导入外源DNA获得抗SMV大豆品系[J].松辽学刊(自然科学版)，1995，3：40-43. [9] 杜海军，芦兴武，赵恩鹏，等.花生DNA导入大豆的后代POD、SOD活性及其同工酶谱分析[J].东北师大学报(自然科学版)，1996，1：87-89. [10] 徐香玲，邹联沛，刘伟华，等.向大豆导入几丁质酶基因的初步研究[J].大豆科学，1999, (2)：101-108. [11] 周思军.大豆抗虫基因转移及转化系统优化研究[D].东北农业大学博士学位论文，2000. [12] 章善庆，童汉华，薛锐，等.利用bar基因导入恢复系提高杂交稻纯度的尝试[J].中国农业科学，1998，31(6)：33-37. [13] 王关林，方宏筠.植物基因工程原理与技术[M].北京：科学出版社，1998：600-601. [14] 萨姆布鲁克J，拉塞尔 D.W著.黄培堂等译.分子克隆实验指南, 第三版[M].北京：2002，科学出版社，502-512. [15] Peng J, Wen F, Lister R M, et al-Inheritance of gus and neo genes in transgenic rice[J].Plant Molecular Biology, 1995, 27：91-104. [16] Wang Z H, Cui H R, Shu Q Y, et al.Genetic analysis of transgenes in the progenies of Bt rice cross to conventional rice varieties[J].Heredities, 2000, 22(5)：309-312. [17] 刘昭军.大豆外缘DNA直接导入技术及育种应用[J].大豆科学，2004， 4：301-306. [18] 刘昭军，李希臣，刘丽燕，等.大豆白化致死突变系的发现与分析[J].大豆科学，2005，3：229-231. [19] 曾君祉，吴有强，王东江，等.花粉管通道(或运载)法转化的植株后代遗传表现及转化机理的探讨[J].科学通报，1998，43(6)：561-566
Full-Text
