CaCl2诱导大豆花粉管通道农杆菌转基因研究
DOI: 10.3969/j.issn.1000-9841.2007.01.013
Keywords: 花粉管通道 ,大豆 ,CaCl ,质粒pCAMBIA ,农杆菌
Abstract:
为了提高大豆花粉管通道法转基因效率，研究直接用农杆菌转化方法的可行性，以秋大豆品种上海本地青为受体材料，用花粉管通道法在三种CaCl2浓度水平下进行质粒pCAMBIA3301转化，又以GV3101、LBA4404、EHA105三种农杆菌菌株直接导入花粉管通道为处理进行了遗传转化。以质粒为外源基因平均结实率为36.83%，T0代种子平均成活率为60.89%，T1植株喷施除草剂后平均存活率为8.24%。以农杆菌直接转化平均结实率为15.92%。T0代种子平均成活率为20.40%，T1植株喷施除草剂后平均存活率为7.79%。对存活的植株提取DNA进行PCR检测，以质粒为外源基因的处理共获得20株转化苗，三种CaCl2浓度水平的转化效率分别为0.56%、1.64%、1.40%，有两种水平的转化效率约为传统转化效率的三倍。以农杆菌直接转化的处理共获得5株转化苗，转化效率分别为0.17%、0.33%、0.29%。
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