大豆叶片DNA提取方法的比较研究
DOI: 10.3969/j.issn.1000-9841.2007.01.014
Keywords: DNA提取 ,SSR ,CTAB ,SDS
Abstract:
以大豆叶片为材料，对大豆基因组DNA提取方法中若干影响因子如提取液、提取液的浓度、蛋白质去除次数、提取步骤等进行比较研究，试图寻找大豆叶片DNA提取的最佳方法。结果表明，碱裂解法提取速度快，但提取的DNA量少，在SSR分析中，银染效果较CTAB、SDS提取液差，CTAB、SDS提取液均能得到较高质量的DNA；在1%~4%CTAB、SDS提取液浓度下，4%CTAB易使DNA产生降解，但不同浓度提取液提取DNA均可用于SSR分析；提取叶片重量在一定范围内时，随抽提次数减少，DNA浓度增加，纯度下降，但即使用氯仿/异戊醇抽提一次，也能够满足SSR分析的需要；不同提取步骤下，使用氯仿/异戊醇抽提2次后使DNA沉出后再溶解抽提2次和直接抽体4次相比，A260/A280值偏大，但A260/A230值较好。
References
[1] ［1］周思君.小样品大批量大豆模板DNA快速分离［J］.大豆科学，1999，18（4）：318-321. [2] ［2］王灏， 王道杰， 谭小力，等.用于RAPD分析的油菜总DNA 的快速提取［J］.西北农业学报，2001，10(3)：32- 34. [3] ［3］戴思兰，陈俊愉，高荣孚，等.DNA提纯方法对9种菊属植物RAPD的影响［J］.园艺学报，1996，23 （2）：169-313. [4] ［4］杜何为，黄敏，张祖新.玉米DNA的小量快速提取［J］.玉米科学，2004，12（2）：114-115. [5] ［5］张永明，孙彩云，梁承邺.一步法提取植物DNA 用于大规模RAPD分析［J］.遗传，2000，22(2)：106. [6] ［6］郭景伦，赵久然，辛景树，等.玉米单株幼芽DNA快速提取新方法［J］.华北农学报，2005，20（1）：38-40. [7] ［7］Wang Shu，R E Knox，R M DePauw，J et al.A Simple DNA Preparation Method for PCR Amplifications in Marker.Assisted Selection of Wheat［J］.Agricultural Sciences in China，2005，4(7)：481-485. [8] ［8］王晓丹，吕慧颖，张敬，等.以PCR为目的的大豆叶片DNA提取方法的比较研究［J］.分子植物育种，2004 2（6）：891-894. [9] ［9］汪小全，皱育苹，张大明，等.RAPD应用于遗传多样性和系统学研究中的问题［J］.植物学报，1996，38（12）：954-962. [10] ［10］卢阳江，郑康乐.提取水稻DNA的一种简易方法［J］.中国水稻科学，1992，6（1）：47-48. [11] ［11］郑康乐，钱慧荣，庄杰云，等.应用DNA标记定位水稻抗稻瘟病基因［J］.植物病理学报，1995，25（4）：307-313.
Full-Text
