未成熟种子子叶节转化体系优化及转EPSPS/GAT基因大豆新材料创制

以丛生芽率为指标，将农杆菌介导的大豆未成熟种子子叶节转化与成熟种子转化体系进行比较，明确了诱导过程中草甘膦筛选浓度、未成熟种子生理状态，改进大豆外植体的获得方式并减少了组培环节，建立了未成熟种子子叶节转化体系。利用Jack黄熟后期的种子作为受体材料，在15mg?L-1的草甘膦筛选浓度下获得了9株PCR检测阳性植株并且生长正常可育，T0代经测序及SouthernBlot分析，进一步证明外源基因已整合进大豆基因组中，其中2个株系的T1代植株经PCR检测符合3∶1的分离比，且表型鉴定筛选出抗性转基因植株，为抗草甘膦转基因大豆育种提供了新材料。