高分辨率溶解曲线分析技术在大豆Ecotilling中的应用

将高分辨率溶解曲线（HighResolutionMelting，HRM）技术运用在大豆Ecotilling中，对256份栽培大豆的大豆异黄酮合酶基因（IFS1）的外显子区域进行SNP筛查，并采用直接测序的方法对HRM检测结果进行验证。结果表明：模板均一化后的检测效果较未均一化的检测效果差异显著，野生型样本与待测样本按1∶1及1∶4比例混样溶解曲线阈值较高，其中1∶4混样适合高通量检测。HRM对IFS1基因外显子区域的检测结果与PCR产物测序的结果比对显示，对IFS1第5段外显子和第7段外显子检测的准确率分别达到91.2％和100％，表明该研究利用HRM技术建立的栽培大豆的Ecotilling技术体系是一种高灵敏度、高通量和低成本检测SNP的新方法。