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大豆科学 2011
大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2011.05.0731, PP. 731-737 Keywords: 大豆过氧化物酶,易错PCR,基因文库,随机突变,酶定向进化 Abstract: 为提高大豆过氧化物酶(soybeanperoxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错PCR产物与质粒载体pPICZα-A分别进行双酶切,经T4DNA连接酶催化连接后,CaCl2法转化重组质粒pPICZα-A-sbp至大肠杆菌DH5α中,成功构建出sbp随机突变文库,库容量约为1.77×106cfu。
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