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大豆科学 2011
大豆细胞质雄性不育系配套保持系线粒体基因组BAC文库的构建DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2011.03.0401, PP. 401-404 Keywords: 大豆,细胞质雄性不育系,保持系,线粒体基因组,BAC文库 Abstract: 以大豆细胞质雄性不育系配套保持系材料(JLCMS1)的黄化苗为材料,纯化得到线粒体。低熔点琼脂糖包埋线粒体成胶块,消化裂解后用HindⅢ部分酶切,通过脉冲场电泳回收40~60kb酶切片段。将回收产物连接到载体pIndigo-BAC5,通过电击转化大肠杆菌DH10B感受态细胞,获得的BAC文库包含2000个单克隆,平均插入片段大小约为50kb,约覆盖大豆线粒体基因组250倍以上。
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