应用逆转录环介导等温扩增技术检测大豆种子中烟草环斑病毒

根据烟草环斑病毒（TRSV）外壳蛋白基因序列设计并合成了1组RT-LAMP引物，利用实时浊度仪监测反应过程，初步建立了烟草环斑病毒的RT-LAMP检测方法，并进行了特异性与灵敏度检测。结果显示，RT-LAMP灵敏度与普通RT-PCR法相当，但检测时间明显缩短，1h即可完成反应。此外，体系中加入钙黄绿素，反应结束后，可通过裸眼观察荧光的有无来判断是否有扩增。对大豆种子中携带的烟草环斑病毒进行了RT-LAMP检测，裸眼判定与仪器监测结果一致。结果证明所建立的TRSVRT-LAMP方法具有快速、特异、灵敏，操作简单的特点，不需复杂仪器设备，适合于TRSV的现场快速检测。