大豆整体子叶节再生体系的建立及应用于农杆菌介导遗传转化初探

以中黄20、周豆02005、周豆11和周豆18整体子叶节为材料，以MSB为基本培养基，通过L9(34)正交设计研究了6-BA、IBA和KT9种浓度组合对大豆整体子叶节丛生芽再生的影响；并将大豆的整体子叶节应用于农杆菌介导的遗传转化研究。结果表明：9种激素组合中以MSB+3.0mg？L-16-BA+0.1mg.L-1IBA+0.5mg.L-1KT最适合周豆02005丛生芽的诱导，而MSB+3.5mg.L-16-BA+0.2mg.L-1IBA+0.2mg.L-1KT最适宜周豆11、周豆18和中黄20的丛生芽诱导；4个大豆基因型中，以中黄20的丛生芽数最多；丛生芽用于诱导生根时，IBA为0.8mg.L-1、NAA为0.8~1.0mg.L-1时较适合大豆生根，其中以中黄20生根数最多。以中黄20整体子叶节为材料，进行了农杆菌介导的遗传转化研究。PCR分析和GUS染色初步表明，外源基因转入了大豆的基因组中，转化率为7.8%，得到转基因植株的周期为35~42d。