转基因大豆BPS-CV127-9PCR定量检测研究

采用SYBRGreen实时荧光定量PCR技术，建立转基因大豆BPS-CV127-9的定量检测方法。通过设计特异引物，扩增内标准基因lectin和BPS-CV127-9的5′侧翼序列，建立2种基因的拷贝数-CT标准曲线，根据标准曲线方程计算样品中的转基因含量，并且通过熔解曲线分析扩增反应特异性。结果表明，lectin基因和侧翼序列标准曲线线性关系良好，R2值分别为0.999和0.998，变异系数（CV）1.50%~18.51%、标准偏差（SD）0.02~0.07。检测4个已知BPS-CV127-9含量（1%、0.5%、0.1%、0.05%）的转基因混合样品，实测值与实际值接近。该检测方法具有快速、灵敏、准确、特异、高通量等优点，可以作为转基因大豆BPS-CV127-9的定量检测方法。