大豆花叶病毒HC-Pro基因保守序列克隆及其RNAi载体的构建

?大豆花叶病毒（soybeanmosaicvirus，SMV）病是全球最主要的大豆病害之一，严重危害大豆的产量和品质。RNA干扰(RNAinterference,RNAi)能够在mRNA水平特异性沉默同源靶基因，为抗病毒作物的培育提供了新的途径。本研究对国内外11个不同SMV流行株系的HC-Pro基因进行了核苷酸序列比对，并以SC3株系的cDNA为模板克隆出高度保守的268bp的基因片段，进而利用GATEWAY技术构建了适合农杆菌介导大豆转化的RNAi表达载体pB7GWIWG2(II)-HC-Proi。并对BP反应和LR反应的纯化产物进行了测序鉴定，测得序列在NCBI上进行比对，匹配度为100％；以35S启动子和终止子设计引物，扩增得到464和478bp两个片段，说明HC-Proi基因与pB7GWIWG2(II)重组形成反向重复结构，载体构建成功。结果为利用RNA干扰技术改良大豆对大豆花叶病毒的抗性奠定了基础。