cDNA代表性差异分析法筛选二羟环氧苯并芘致癌相关基因片段

？目的采用cDNA代表性差异分析法,分离二羟环氧苯并芘诱导恶性转化的细胞与对照组细胞之间的差异表达基因。方法先从细胞中提取mRNA并合成双链cDNA,双链DNA以Sau3AI内切酶消化,连接接头并经PCR扩增。以BPDE诱导恶变细胞的cDNA为“检测子”、以对照组细胞cDNA为“驱赶子”进行消减杂交。结果经3轮消减杂交后分离出5个cDNA片段,在琼脂糖凝胶上清晰显示210bp以下的5条条带,这些片段分别与总RNA作Northern印迹杂交证实它们均来自BPDE诱变的细胞。结论cDNA代表性差异分析法是筛选化学致癌相关基因的有效、灵敏的方法。