组蛋白-DNA共振光散射法的建立及应用

？目的建立灵敏度高、简单方便、试剂安全的共振光散射方法测定生物体DNA含量.方法在pH5.5的HAc-NaAc缓冲体系中,将组蛋白与DNA混合,在入射光波长和荧光波长相同条件下,用普通荧光分光光度计测定溶液的共振光散射强度;光散射强度与DNA浓度呈良好线性关系时测定核酸含量;应用该法检测鼠肝和酵母体内的DNA含量.结果扫描光谱显示最大光散射波长为551nm,测定最佳条件为pH5.5;组蛋白用量10μg/ml.ctD-NA、fsDNA、hpDNA等3种核酸均与光散射强度有良好线性关系,相关系数均大于0.99.与常规分光光度法对照测定样品DNA含量,相对误差<10%.结论该方法灵敏度优于常规方法2～3个数量级,快速方便,适合于生物体内核酸含量测定.