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中国公共卫生 2004
重组人类抗砷相关基因在大肠埃希菌的表达DOI: 10.11847/zgggws2004-20-05-17, PP. 540-541 Keywords: 人类抗砷相关基因cDNA,重组DNA,原核表达,蛋白纯化 Abstract: ?目的构建含重组人类抗砷相关基因(humanarsenicresistencerelatedgene,hARRG)的表达载体,诱导其在转化菌表达,分离纯化表达蛋白,研究该蛋白质的理化性质、抗砷功能和免疫活性,深入研究人类对砷化物的抵抗作用。方法将hARRGcDNA开放阅读框亚克隆到原核表达载体Pet11C中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白质,利用阴离子交换柱Sepharose纯化蛋白质,SDS-PAGE胶电泳观察结果。结果将hARRGcDNA成功亚克隆到原核表达载体Pet11C中,并成功在大肠杆菌中表达,表达的hARRG蛋白占菌体蛋白的5%左右,该蛋白质被分离纯化。结论原核表达载体Pet11C可以在大肠杆菌中表达hARRGcDNA,可用阴离子交换柱Sepharose纯化抗砷相关蛋白质。
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