食品中副溶血弧菌荧光定量PCR方法快速检测

？目的利用荧光定量PCR技术,建立食品中副溶血弧菌污染的快速、准确的定量检测方法.方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列设计合成副溶血弧菌FQ-PCR诊断试剂盒,研究其灵敏度、特异性,并应用于模拟食品样本检测.结果在31株不同菌株的检测中,8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其他23株弧菌科及其他菌属的菌株均为阴性;纯菌条件下定量检测低限10cfu/ml;对模拟样本直接进行,检测低限为103cfu/g,经培养增菌后,检测低限则达到2cfu/g.结论该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,检验周期仅需36h,扩增与检测在封闭单管进行,可避免常规PCR方法易污染缺陷,具有很好的推广应用前景.