结核杆菌抗原对人γδT细胞体外增殖影响

？目的观察结核杆菌抗原(Mtb-Ag)对人γδT细胞体外增殖的影响,以解决医学研究中γδT细胞来源不足问题。方法应用酸性改良罗氏培养基分离培养结核杆菌及丙酮酸钠液体培养基进行扩增,通过85℃水浴灭活,超声波细胞破碎制备Mtb-Ag。在体外以不同的剂量刺激人外周血单个核细胞(PBMC),采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测增殖程度,应用流式细胞仪检测γδT细胞增殖的百分率。结果在一定范围内随着刺激剂量的增加PBMC增殖亦增加。流式细胞仪分析增殖结果显示,7μg/ml刺激组γδT细胞的增殖率最高(约为49.08%)。但当刺激剂量增加至9μg/ml时,γδT细胞增殖比率开始降低(约为32.62%),而αβT细胞增殖比率增加明显(约为36.76%)。结论Mtb-Ag在合适刺激剂量时,可对人γδT细胞发挥优势扩增;当剂量过大时则对αβT细胞发挥优势扩增。