原位RT-PCR法定位检测柯萨奇B病毒RNA

？目的用定位检测细胞或组织中柯萨奇B病RNA的原位RTPCR方法(直接法).方法对柯萨奇B病毒(1～6型)感染HeLa细胞,经核酸酶(DNase和RNase)处理后的病毒感染HeLa细胞以及非感染的HeLa细胞进行RTPCR和原位RTRCR检测.结果经原位RTPCR扩增后,病毒感染的HeLa细胞呈蓝黑阳性信号;并且这种阳性信号经RNaseA作用而消失,却不受DNase作用的影响;而非感染的HeLa细胞则不着色,其显示的结果与RTPCR的结果一致.结论原位RTPCR法可特异地检测柯萨奇B病毒感染HeLa细胞中的病毒RNA,是一种特异和敏感的定位检测方法,可应用于研究该病毒的持续性感染及其与克山病等相关疾病的关系.