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中国公共卫生 2001
甲型肝炎减毒活疫苗生产中病毒释放的最佳方法探索DOI: 10.11847/zgggws2001-17-08-10, PP. 687-688 Keywords: 甲型肝炎,减毒活疫苗,超声波,冻融,病毒释放 Abstract: ?目的探索甲型肝炎减毒活疫苗(简称甲肝活疫苗)生产中感染细胞释放病毒的最佳方法.方法采用超声波细胞粉碎仪、-70℃及液氮冻融3种方法粉碎细胞,对细胞破碎情况、病毒抗原滴度和感染性滴度进行了比较.结果超声波连续粉碎3次(90秒/次)、-70℃反复冻融粉碎4次和液氮冻融粉碎6次,细胞破碎率分别为94%、82%和81%;病毒抗原滴度和感染性滴度均达高峰;抗原滴度均为1:256,感染性滴度(logCCID50/ml)分别为8.67、6.5和6.0.继续超声和-70℃冻融粉碎细胞,病毒抗原滴度和感染性滴度基本不变,而液氮冻融至第10次时,抗原滴度无明显变化,感染性滴度下降2.0logCCID50/ml.结论超声波破碎率最高,细胞碎片最小,病毒充分释放,且不损伤病毒;-70℃和液氮冻融破碎率较低,细胞碎片较大,病毒释放效率低,病毒损伤以液氮冻融为重.
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