逆转录聚合酶链反应用于检测恶性疟原虫的初步研究

？目的建立逆转录聚合酶链反应系统,用于检测恶性疟原虫感染.方法以恶性疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因为靶片段,设计一对特异引物,分别采用RT-PCR技术和PCR技术进行检测恶性疟原虫血样并比较两者检测的敏感性.结果从培养的恶性疟血样中扩增出359bp特定扩增带,而间日疟和健康人血样均未见扩增带.经限制性内切酶分析证实扩增产物为目的片段.检测系统初步显示可检出恶性疟血样中0.34个疟原虫所含的RNA模板.以RNA为检测对象的RT-PCR肉眼可见条带的检测水平较以DNA为检测对象的PCR扩增高.结论RT-PCR检测恶性疟原虫方法具有敏感性高、特异性强的特点,有一定的应用价值.