亚洲牛带绦虫自吞噬相关蛋白3基因克隆及表达

？目的从亚洲带绦虫成虫cDNA质粒文库中识别并预测自吞噬相关蛋白(autophagyrelatedprotein3-like,APG3)基因,并将该基因进行克隆表达,为进一步研究其生物学功能提供基础依据.方法利用生物信息网站及其他分析软件包,分析该蛋白质理化特性等,并将其克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,经PCR、双酶切及测序鉴定之后诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定.结果该基因全长为1331bp,编码区为92~1099,编码335个氨基酸,理论分子量、等电点分别为37498.5Da和4.71.PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a(+)-TaAPG3重组质粒构建成功.经过尿素破包涵体法得到纯化蛋白.结论发现亚洲牛带绦虫APG3基因,成功构建重组原核表达质粒并表达出融合蛋白.