亚洲带绦虫EIFs3克隆与免疫反应性分析

？目的对亚洲带绦虫真核翻译起始因子3(eukaryotictranslationinitiationfactor3subunit,EIFs3)进行克隆及免疫学初步研究.方法利用在线生物信息学工具从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出含有EIFs3基因,并将该基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Westernblotting)进行免疫学分析.结果PCR,双酶切及DNA测序均显示重组体构建成功,用亲和层析法得到高纯度的蛋白,且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫及猪带病人血清识别,表明其具有免疫反应性.结论亚洲带绦虫成虫EIFs33基因可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达.