PFOA通过ERKMAPK途径损伤Sertoli细胞紧密连接

？目的探讨PFOA对Sertoli细胞紧密连接的影响及分子机制。方法体外分离纯化Sertoli细胞,通过细胞毒性实验,观察PFOA对原代Sertoli细胞生长影响;利用流式细胞术anexin-Ⅴ/PI双染法检测PFOA对Sertoli细胞凋亡的影响;利用双室培养模型,监测跨上皮电阻抗(TER),观察PFOA对紧密连接功能的影响;采用Westernblot法检测紧密连接相关蛋白及ERK的表达。结果0~100μmol/L剂量的PFOA对细胞生长无明显影响(P>0.05);与对照组比,50μmol/L的PFOA未见有明显的促凋亡作用[凋亡率为(9.7%±3.2)%],P>0.05;但可明显降低Sertoli细胞的TER值[(37.35±5.2)Ωcm2],联合ERK特异性抑制剂PD98059处理后TER值升高[(49.85±6.4)Ωcm2],(P<0.05);50μmol/L的PFOA可下调紧密连接蛋白claudin-11、ZO-1和occludin的表达,并上调p-ERK的表达(P<0.05),且可被PD98059明显抑制(P<0.05)。结论PFOA可能通过ERKMAPK途径损伤Sertoli细胞间的紧密连接。