两种细胞建立肝细胞氧化损伤模型比较

？目的比较过氧化氢诱导人肝癌细胞株(HepG2)与正常肝细胞株(Changliver)建立的肝细胞氧化应激损伤模型。方法用不同浓度过氧化氢诱导HepG2细胞和Changliver细胞氧化应激损伤,采用噻唑蓝法检测细胞生长抑制率;分光光度法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性,以及肝细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)含量。结果作用时间在0.5~4h时,在75~600μmol/L浓度范围内,过氧化氢可浓度和时间依赖性地抑制2种肝细胞增殖,促使细胞内AST、ALT和LDH向培养液中释放;细胞中SOD和GSH活性明显降低,MDA含量明显升高,表明2种肝细胞氧化损伤模型构建成功;选择300μmol/LH2O2作用4h为致HepG2和Changliver细胞氧化应激损伤的最佳条件,结果显示,HepG2和Changliver细胞的生长抑制率分别为62%和76%,培养液中ALT、AST、LDH活性分别为(18.2±0.2)、(34.2±4.6)、(544.2±26.8)和(19.1±0.1)、(30.3±2.5)、(536.8±22.3)U/L,细胞中MDA含量分别为(7.8±0.9)和(8.6±1.1)nmol/mgprot。结论HepG2与Changliver细胞均可用于氧化应激细胞损伤模型的制备。