HIVⅠ型外膜蛋白/干扰素A-2b的构建与表达

？目的构建艾滋病病毒外膜蛋白(env)与干扰素(IFNα-2b)融合基因表达质粒,观察其在痘苗病毒中共表达结果。方法利用基因重组技术,将IFNα-2b基因片段插入到env基因的nt8383位点,经脂质体转染与血凝素阴性蚀斑筛选,挑出重组痘苗病毒。经免疫荧光、免疫印迹(Westernblot)和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)鉴定表达产物。结果间接免疫荧光实验结果显示,转染重组质粒的细胞表面有绿色荧光。Western-blot与Dot-ELISA结果均显示,重组质粒转染细胞的裂解物中存在表达的env/IFNα-2b蛋白。结论成功地构建了重组真核细胞表达质粒,表达的蛋白具有良好的免疫原性与免疫反应性。