泌乳乳腺作为真核基因的有效表达系统研究

？目的探讨泌乳腺组织作为真核基因快速表达系统的可行性。方法以蚓激酶(LK)作为目的标志基因,分别构建了在泛组织嗜性的巨细胞病毒(CMV)立即早期启动子、逆转录病毒长末端重复序列(LTR)和组织特异性的beta-酪蛋白启动子调控下的3种真核表达载体pICLK、pLLKSN和pIbLK。制备各重组质粒后,以泌乳期羊乳腺作为支持系统,在处于稳定泌乳阶段分别注射不同量的重组质粒于山羊乳腺组织中。在注射后不同时间采集奶汁,检测纤溶活性。结果蚓激酶的不同重组质粒在注射到乳腺组织之后迅速得到表达,注射后6~9h蚓激酶表达量达到高峰,并可持续至72h以上;不同表达载体间表达量略有变化,但差异无统计学意义。结论泌乳乳腺组织可以作为真核基因的1种快速有效的表达系统。