甲基亚砷酸对内皮型一氧化氮合酶磷酸化影响

？目的观察无机砷的活性中间产物-甲基亚砷酸(MMAⅢ)对牛主动脉血管内皮细胞(BAEC)的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)磷酸化以及活性氧自由基(ROS)产生的影响。方法培养的BAEC分别暴露于MMAⅢ(0.75μmol/L,0~15min);亚砷酸钠(iAsⅢ,100μmol/L,0~60min);或N-乙酰半胱氨酸(NAC,1mmol/L)预处理2h后,再暴露于MMAⅢ(0.75μmol/L,0~15min)。收获细胞悬液进行eNOS磷酸化蛋白的westernblot分析;应用二氯二乙酰荧光素法(H2DCFDA)观测细胞内的ROS产生。结果BAEC暴露于MMAⅢ(0.75μmol/L)15min后,eNOSSer1179磷酸化显著增加(P<0.05),NAC预处理(1mmol/L)能够抑制这一现象;iAsⅢ暴露也能够诱导eNOSSer1179磷酸化(P<0.05),但是需要高浓度和更长的暴露时间(100μmol/L,30min);MMAⅢ(0.75μmol/L)暴露能够诱导BAEC产生ROS,NAC预处理(1mmol/L)能够抑制这一现象。结论MMAⅢ暴露能够诱导细胞内产生ROS以及ROS依赖性eNOS磷酸化。