亚洲牛带绦虫WD40基因表达及免疫学分析

？目的对亚洲牛带绦虫WD40基因进行克隆、表达和免疫学研究.方法将亚洲牛带绦虫成虫WD40基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用免疫印迹试验(WesternBlotting)进行免疫学分析.结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明,pET-28a(+)-WD40重组质粒构建成功.SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中获得高效表达.重组蛋白能识别感染了亚洲牛带绦虫的猪血清和患者血清,表明其具有免疫反应性.结论亚洲牛带绦虫WD40基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达,为进一步研究该蛋白的功能提供了基础依据.