BRL-CM小鼠胚胎干细胞及体外诱导的研究

？目的探讨以Buffalo大鼠肝细胞培养上清(BRL-CM)替代含LIF培养液体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC)的可行性;无血清体外诱导ESC为神经前体细胞(NPC).方法以BRL-CM维持ESC生长并抑制其分化,用含LIF的培养液作为对照,硝基四氮唑蓝/5-溴-4氯-3-吲哚基磷酸(NBT/BCIP)显色检测碱性磷酸酶.采用N2选择性无血清培养法获取NPC,免疫组化法检测巢蛋白(Nestin)鉴定.结果BRL-CM与含LIP的培养液一样能维持ESC未分化状态,无血清培养基诱导ESC后获得细胞的86%为NPC.结论BRL-CM可替代LIF用于ESC培养,且经济、简便.采用N2选择性培养基可获得较高纯度的NPC.