PCR检测肠出血性大肠杆菌O157：H7

？目的研究快速、特异、灵敏的检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的多重PCR方法,并比较单一PCR和多重PCR对检测灵敏度的影响.方法选择O157:H7的O抗原、H鞭毛抗原及SLT1和SLT2毒素基因特异的4对引物,分别或共同进行PCR扩增,检测40株O157:H7和非O157:H7菌株,将细菌按101-106稀释后比较PCR的检测灵敏度.结果所有O157:H7菌株均在497bp和625bp处出现O157抗原基因和H7抗原基因产物,其产毒株在484bp和(或)210bp处出现SLT2和(或)SLT1基因产物,非O157:H7菌株PCR结果均为阴性;单一PCR检测灵敏度为150CFU/PCR反应,多重PCR为>1500CFU/PCR反应.结论在经过增菌后,多重PCR比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便,为产毒和非产毒O157:H7的诊断提供了新的手段.