多重逆转录聚合酶链反应检测主要上呼吸道病毒

？目的建立用多重逆转录聚合酶链反应(mRT-PCR)检测甲1型、甲3型、乙型流感病毒以及呼吸道合胞病毒(RSV)A型、B型等主要上呼吸道病毒的方法,以快速检测上呼吸道感染主要病毒及对甲型、甲亚型、乙型流感病毒在上海地区人群感染、流行情况调查。方法采用经MDCK细胞接种培养的甲3型、乙型流感病毒和Hep-2细胞接种培养的RSVA型、B型标准毒株病毒液,以及甲1型、甲3型、乙型流感病毒和RSVA型、B型混合毒株病毒液,使用5组引物,分别为HA1-5a1和HAl-3a1(甲1型流感病毒)、HA3-5a1和HA3-3a1(甲3型流感病毒)、NP-5b1和NP-3b1(乙型流感病毒)、RSVAF和RSVAR(RSVA型)、RSVBF和RSVBR(RSVB型),经mRT-PCR,琼脂糖凝胶电泳,于紫外灯下观察上述病毒特异核苷酸条带。结果甲1型、甲3型、乙型流感病毒,RSVA型、B型分别在431,210,390,334,183bp处出现清晰的5条DNA条带。结论应用5组引物,mRT-PCR可用于快速检测临床上呼吸道感染标本中的流感病毒和RSV,并可对其进行分型,对上呼吸道病毒感染性疾病的诊断和流感的监测方面是非常重要的。