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中国公共卫生 2003
梅毒密螺旋体Tp47重组蛋白的表达及其应用DOI: 10.11847/zgggws2003-19-02-08, PP. 145-146 Abstract: ?目的在大肠埃希菌中表达梅毒密螺旋体(Treponemapallidum,Tp)Tp47重组蛋白,用其建立诊断梅毒的酶联免疫法(enzymeimmunoassay,EIA).方法应用聚合酶链反应法(PCR)从Tp全基因组中扩增目的片段Tp47,并将其克隆到表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET-30a-Tp47.在大肠埃希菌中表达重组蛋白Tp47,亲和层析柱纯化,建立EIA法,检测血清中抗-Tp抗体.结果获得了Tp47基因重组蛋白的高效表达,该重组蛋白存在于细菌上清中,占全菌体蛋白12%左右,分子量约39kDa.蛋白印迹法(westernblot,WB)显示,Tp47重组蛋白具有良好的抗原性.用Tp47重组蛋白建立EIA法,检测11份梅毒血凝试验阳性和28份阴性血清,灵敏度为100%(11/11),特异性为96.4%(27/28).结论Tp47重组蛋白EIA可用于梅毒的诊断.
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