HPLC法测定人脑膜成纤维细胞IDO活性

？目的建立反相高效液相色谱法测定人脑膜成纤维细胞(Humanmeninxfibroblast,HMF)的吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)活性,并探讨IDO的临床意义.方法以荧光检测器和紫外检测器分别检测色氨酸和犬尿氨酸,间接测定IDO活性,采用3H-尿嘧啶(3H-U)特异标记的弓形虫在HMF内的增殖实验.结果色氨酸和犬尿氨酸的平均回收率分别为9909%,10218%,变异系数分别为103%,189%,最低检测限分别为877,3275ng/ml.被IFN-γ诱导产生的IDO可降解胞内必需氨基酸色氨酸而抑制弓形虫生长.结论本法为一种灵敏、简便和可靠的反相高效液相色谱法,IDO可抑制弓形虫生长.