人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统序列分析

？目的对人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统的构建及序列分析。方法采用RT-PCR方法将肺组织中提取总RNA扩增人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的cDNA序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1多克隆位点中,构建重组表达质粒,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。结果人谷胱甘肽硫转移酶M1克隆到真核表达质粒pcDNA3.1中,测序结果同GenbankGSTM1(GI:183668)cDNA序列相比较,在619位点C→A,氨基酸由Pro→Thr;在519位点C→G,编码的氨基酸仍为lys;在528位点C→T,编码的氨基波仍为Asp,同源性为99%,基因登陆号为AY532926。结论人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统的构建,为进一步进行真核细胞和动物的解毒机制研究,提供应用材料。