人参总皂苷增强小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接功能的实验研究

目的探讨人参总皂苷(totalginsenosides，TGs)对小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接(Gapjunction，GJ)功能的影响及其作用机制。方法MTT法测TGs对B16细胞生长的影响，荧光显微镜结合荧光示踪法分析GJ功能变化，以各试验组受体细胞均数与对照组的比值作为评价GJ功能的指标，流式细胞仪检测对照组和实验组的绿色荧光供体细胞(G4)与双阴性受体细胞(G3)比值(G4/G3)变化分析GJ功能改变，Westernblot分析连接蛋白(Connexin，Cx)表达。结果1~8μmol·L-1TGs处理B16细胞48h对其生长状态无明显影响；用1，2，4，8μmol·L-1TGs处理细胞48h后，荧光显微镜下观察，TGs能明显提高B16细胞荧光染料Calcein传递，对照组和实验组G4/G3比值分别是0.06±0.01，0.09±0.02，0.10±0.01，0.12±0.03和0.13±0.02，各实验组G4/G3值明显高于对照组(P<0.01)；Westernblot分析结果显示，用1，2，4，8μmol·L-1TGs处理B16细胞48h对其连接蛋白Cx32表达有明显的增强作用，但对Cx43和Cx26表达无影响。结论体外较低浓度TGs能够有效促进B16细胞GJ功能，并具有一定的剂量-效应关系。1~8μmol·L-1TGs虽能显著促进B16细胞Cx32蛋白的表达，但在本试验浓度范围内并无明显的量效关系，且对Cx43和Cx26表达无明显影响。