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ISSN: 2333-9721
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甘蓝型油菜胞质体大量制备技术的研究

, PP. 77-81

Keywords: 甘蓝型油菜,胞质体,Percoll,吖啶橙

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Abstract:

?用Percoll密度梯度离心法和吖院橙(acridineorange,AO)结合光照处理两种方法,均从甘蓝型油菜下胚轴原生质体制备到胞质体、在2个Percoll梯度、30000g(18000r/min)与12C离心60min的条件下,获得了含胞质体80%以上的群体;以含80、100、120mg/LAO的酶液酶解下胚轴原生质体,纯化后分别给以3h、2h、lh光照(光强度:4000lX)可使原生质体几乎不能分裂,但保持5d以上的生活力。由于光照导致AO-DNA复合体的DNA降解,造成核不可逆失活,从而可以认为经AO与光照处理的原生质体是胞质体。

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