干旱胁迫条件下发菜Ferritin差异表达与基因克隆

？发菜(Nostocflagelliforme)是一种陆生固氮蓝藻,具有强烈的旱生生态适应性。运用双向电泳技术、凝胶图像分析、MALDI-TOF-TOF/MS质谱鉴定和数据库检索,发现发菜Ferritin在干旱胁迫条件下表达量逐渐降低。根据鉴定的Ferritin已知氨基酸序列设计简并性引物克隆该基因,获得了长度为540bp的DNA,GenBank登陆号为HM854287。序列比较显示该基因具有较高的保守性,蛋白质二级结构主要由α螺旋和随机卷曲构成。RT-PCR分析表明,FerritinmRNA在干旱胁迫条件下表达量逐渐降低,与Ferritin的表达趋势一致。将Ferritin基因在大肠杆菌中表达,获得符合预期的外源重组蛋白(22.4kD)。实验结果可为进一步研究发菜耐旱的分子机理及探讨发菜对极端干旱环境的适应和保护机制奠定基础。