金鱼藤中ApNAP基因的克隆和表达模式分析

？金鱼藤（Asarinaprocumbens）是玄参科金鱼藤属多年生藤本植物，在园林中常用于垂直绿化，是良好的观赏植物，但金鱼藤叶片衰老后很快干枯并脱落，仅留光秃的茎蔓，使其观赏价值大大降低。AtNAP是拟南芥NAC基因家族中与衰老相关的转录因子，在调控叶片衰老过程中有重要的作用。本研究以金鱼藤衰老叶片为材料，运用RT-PCR和RACE技术克隆金鱼藤中ApNAP基因cDNA序列。结果显示，该基因位于细胞核中，cDNA全长为1341bp，开放阅读框为936bp，编码311个氨基酸，相对分子量为35.21kD，等电点为9.13；ApNAP基因组全长1526bp，含有2个内含子和3个外显子。多重序列比对表明，ApNAP属于NAC转录因子家族。系统进化树分析显示，ApNAP属于NAP亚组，与AtNAM的同源关系最近。实时荧光定量PCR结果表明，受自然状态下衰老和黑暗处理的诱导，ApNAP基因表达量增加，这进一步说明ApNAP基因参与调控金鱼藤叶片衰老的过程。该基因的分离对利用转基因技术延缓金鱼藤叶片衰老，提高金鱼藤在园林绿化中的观赏价值具有实际意义。