RT-PCR方法同步检测兰州百合(Liliumdavidiivar.unicolor)两种主要病毒

？建立并优化了以18SrRNA为内参照的特异性检测兰州百合(Liliumdavidiivar.unicolor)两种主要病毒:黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)和百合无症病毒(Lilysymptomlessvirus,LSV)的三重RT-PCR体系。结果表明,52.5°C的退火温度、0.025U/μL的TaqDNA聚合酶、0.6mmol/L的dNTP浓度、4mmol/L的Mg2+浓度、0.4μmol/L的各引物浓度以及30个循环等是三重PCR体系扩增的最佳条件;同时用该优化体系检测了兰州百合不同取样部位的病毒差异,发现LSV在不同取样部位的特异扩增条带的强度比较一致,而CMV差距相对较大,外鳞片CMV相对含量在整个感病植株中最高。为兰州百合主要病毒检测、脱毒组培快繁提供了技术支撑。