OALib Journal期刊
抗真菌和抗除草剂基因多价植物表达载体构建及对烟草遗传转化的研究
, PP. 86-93
Keywords: 融合基因 ,几丁质酶 ,β-1 ,3-葡聚糖酶 ,bar基因 ,植物表达载体
Abstract:
利用基因重组技术,将木霉几丁质酶基因(Chi)和β-1,3-葡聚糖酶基因(Glu)进行融合并将其引入含bar基因的载体pAHC25中,成功构建了由Ubiquitin启动子分别驱动Chi-linker-Glu和bar的中间载体,然后将其上的Ubi-Chi-linker-Glu-nos和Ubi-bar-nos表达盒引入pBI121中,获得兼具除草剂抗性基因bar和真菌抗性基因Chi与Glu的三价植物表达载体pBIb-CG,并对烟草进行遗传转化,经PCR及Southern检测,共获得转基因烟草32株。外源基因已整合到烟草基因组中。离体抑菌试验表明转基因烟草叶片提取液对木霉菌和镰刀菌表现出一定的抗性。
References
[1] Mauch F, Mauchman I B, Boll E R T. Antifungal hydrolases in pea tissueⅡ. Inhibition of fungal growth by combination of chitinase and β-1, 3-glucanase[J]. Plant Physiology, 1988, 88: 936-942. [2] 陈三凤. 几丁质酶研究历史和发展前景[J]. 微生物学通报, 1993, 20(3): 156-160. [3] Samac D A. Increased diseased susceptibility of Arabidopsis plants expressing chitinase antisense RNA[J]. Plant Physiology, 1993, 102(2): 112-123. [4] 彭仁旺, 管考梅, 黄秀梨. 壳多糖酶研究的概况及最新进展[J]. 生物化学与生物物理进展, 1996, 23(2): 103-107. [5] Zhu Q. Enhanced protection against fungal attack by constitutive co-expression of chitinase and glucanase genes in transgenic tobacco[J]. Biotechnology, 1994, 12: 807-815. [6] 李继红, 邵寒霜, 郑楷, 等. 烟草几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶cDNA植物表达载体的构建及转化番茄的研究[J]. 热带作物学报, 1999, 20(1): 29-33. [7] 谢先芝. 抗虫转基因植物的研究进展及前景[J]. 生物工程进展, 1999, 19(6): 47-52. [8] Xu D, Xue Q Z, Duan X, et al. Constitutive expression of a cowpea tryp sin inhibitor gene, CpTi, in transgenic rice plants confers resistance to two major rice insect pests[J]. Molecular Breeding, 1996, 2: 167-173. [9] 于志华, 陈敏勇, 顾红雅, 等. 抗除草剂旱稻转基因植株的获得[J]. 北京大学学报(自然科学版), 1996, 32(4): 499-504. [10] Norman R J, Johnston T H. Arkansas Rice Research Studies (Research Series456)[M]. Arkansas Agriculture Experiment Status, 1997, 27(9): 12-16. [11] 杜建中, 孙毅, 王景雪, 等. 转基因抗丝黑穗病玉米的遗传、表达及选育研究[J]. 分子植物育种, 2007, 5(4): 467-474. [12] 杜建中, 孙毅, 王景雪, 等. 转基因玉米中目的基因的遗传表达及其抗病性研究[J]. 西北植物学报, 2007, 27(9): 1720-1727. [13] 杜建中, 孙毅, 王景雪, 等. 转基因抗矮花叶病玉米的遗传、表达及抗病性研究[J]. 生物技术通讯, 2008, 19(1): 43-46. [14] 朱常香, 宋云枝, 张杰道, 等. 抗虫、抗除草剂转基因玉米的获得及遗传研究[J]. 山东农业大学学报, 2002, 33(2): 120-125. [15] 刘小红, 张红梅, 张红伟, 等. 抗除草剂转基因玉米研究[J]. 西南农业学报, 2007, 20(1): 53-57. [16] 谷俊涛, 赵红梅, 刘祝玲, 等. 农杆菌介导白三叶草高效遗传转化和转基因植株再生[J]. 草业学报, 2007, 16(2): 84-89. [17] 孙勇如. 遗传学指南[M]. 北京: 湖南科学技术出版, 1989. 450-452. [18] 汪波, 彭定祥, 孙珍夏, 等. 根癌农杆菌介导苎麻转绿色荧光蛋白(GFP) 基因植株再生[J]. 作物学报, 2007, 33(10): 1606-1610. [19] 杨锦芬, 郭振飞, 杨静. 柱花草9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶基因(SgNCED1) 的克隆及表达分析[J]. 草业学报, 2007, 16(3): 21-28. [20] 方宏筠, 王关林, 王火旭. 抗菌肽基因转化樱桃矮化砧木获得抗根瘤病的转基因植株[J]. 植物学报, 1999, 41(11): 1192-1198. [21] Stanton B G. Multigene plant transformation: More is better[J]. Nature Biotechnology, 1998, 16: 1009-1010. [22] Hedi M Z. Transformation of 12 different plasmids into soybean via particle bombardment[J]. Plant Cell Reports, 1996, 15: 500-505. [23] 冯道荣, 许新萍, 卫剑文, 等. 水稻基因枪多基因转化研究[J]. 植物学报, 1999, 11(1): 1-5. [24] Chen L, Marmey P, Taylor N J. Expression and inheritance of multiple transgenes in rice plants[J]. Nature Biotechnology, 1988, 16: 1060-1064. [25] 戴顺洪, 李良材, 丁月云, 等. 水稻基因枪多基因转化研究[J]. 遗传学报, 1998, 25(4): 345-350. [26] Christou P. Co-transformation frequencies of foreign genes in sobean cell culture[J]. Theoretical and Applied Genetics, 1990, 79(2): 337-342. [27] 陈雁, 饶勇强, 孟金陵. 转双价广谱抗病基因创造甘蓝型油菜抗菌核病新品种的研究[J]. 分子植物育种, 2003, 1(4): 457-463. [28] 吴家和, 张献龙, 罗晓丽, 等. 转几丁质酶和葡聚糖酶基因棉花的获得及其对黄萎病的抗性[J]. 遗传学报, 2004, 31(2): 183-188. [29] 武东亮, 崔洪志, 郭三堆. 融合杀虫基因植物表达载体的构建及转基因烟草的获得[J]. 中国农业科学, 2001, 34(5): 465-468.
Full-Text
Contact Us
service@oalib.com
QQ:3279437679
WhatsApp +8615387084133
