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ISSN: 2333-9721
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草业学报  2014 

金属硫蛋白对热应激下体外培养奶牛淋巴细胞的影响

DOI: 10.11686/cyxb20140325, PP. 215-223

Keywords: 金属硫蛋白,热应激,淋巴细胞凋亡,细胞培养,奶牛

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Abstract:

本研究的目的在于探讨外源性金属硫蛋白(MT)对热应激下体外培养奶牛淋巴细胞凋亡的影响。将屠宰获取的奶牛脾脏淋巴细胞随机分为4组,每组细胞培养液中MT的终浓度分别为0μg/mL(对照组)、70μg/mL(第Ⅰ组)、140μg/mL(第Ⅱ组)、210μg/mL(第Ⅲ组),同时置于细胞培养箱(37℃、5%CO2)中培养20h,之后同时置于43℃水浴锅中进行热应激处理1h,再回细胞培养箱中培养3h,然后利用形态学观察、RT-PCR等方法进行各项指标的检测。结果如下,1)通过形态学观察和AO/EB染色观察,表明添加MT可以有效缓解热应激对奶牛淋巴细胞的损伤,但缓解效果随MT浓度的增加而下降;2)第Ⅰ~Ⅲ组的CAT活性、SOD活性和GSH-Px活性均高于对照组(P<0.01),MDA含量均低于对照组(P<0.01),表明MT能够有效改善淋巴细胞的抗氧化能力;3)试验Ⅰ~Ⅲ组的Bax基因相对表达量均显著低于对照组(P<0.01),但试验Ⅰ~Ⅲ组Bcl-2基因的表达量和p50基因的表达量均显著低于对照组(P<0.01),表明MT可以调节与细胞凋亡相关基因的表达。综上所述,添加MT可以降低奶牛淋巴细胞死亡率,改善奶牛淋巴细胞抗氧化性能,抑制奶牛淋巴细胞凋亡,以添加终浓度为70μg/mL的MT效果最好。

References

[1]  Thirumoorthy N, Kumar K M, Sundar A S, et al . Metallothionein: An overview[J]. World Journal of Gastroenterology, 2007, 13(7): 993-996.
[2]  Vasak M. Advances in metallothionein structure and functions[J].Journal of Trace Elements in Medicine & Biology, 2005, 19(1): 13-17.
[3]  张彬, 谭琼, 肖兵南, 等. 外源性金属硫蛋白对奶牛泌乳性能和抗氧化状况的影响[J]. 草业学报, 2009, 18(6): 137-143. 浏览
[4]  张彬, 薛立群, 李丽立, 等. 外源金属硫蛋白对奶牛抗热应激调控及SOD基因表达的影响[J]. 应用生态学报, 2007, 18(1): 193-198.
[5]  张彬, 谭琼, 李丽立, 等. 金属硫蛋白对奶牛血液抗氧化酶GSH-Px和CAT基因表达的影响[J]. 草业学报, 2010, 19(3): 132-138. 浏览
[6]  李丽立, 张彬, 印遇龙, 等. 猪肝金属硫蛋白的诱导[J]. 广西农业生物科学, 2004, 23(4): 270-273.
[7]  周振峰, 崔瑞莲, 王加启, 等. 热应激对体外培养奶牛乳腺上皮细胞生长、凋亡及其热休克蛋白mRNA转录的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2010, 41(5): 600-607.
[8]  蔡亚非, 李莲, 刘庆华, 等. 热应激奶牛外周血淋巴细胞凋亡和 Bax - a 基因表达[J]. 南京农业大学学报, 2005, 28(1): 66-70.
[9]  宋学立, 钱令嘉, 李凤芝. 热应激对乳鼠心肌细胞损伤作用的研究[J]. 中国应用生理学杂志, 2000, 16(3): 227-230.
[10]  刘庆华, 甘乾福, 梁学武. 热胁迫下奶牛肝脾HSP70的表达特征及脾淋巴细胞凋亡[J]. 中国兽医科学, 2012, 42(2): 186-191.
[11]  王艳凤. 氟致体外培养牛脾脏淋巴细胞凋亡机理的研究[D]. 哈尔滨: 东北农业大学, 2008.
[12]  刘颖, 纪超, 吴伟康. 金属硫蛋白介导附子多糖对缺氧复氧心肌细胞的保护[J]. 中国实验方剂学杂志, 2012, 18(4): 172-175.
[13]  Zbinden S, Wang J S, Adnika R, et al . Metallothionein enhances angiogenesis and arteriogenesis by modulating smooth muscle cell and macrophage function[J]. Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology, 2010, 30: 477-482.
[14]  Kang J Y. Metallothionein redox cycle and function[J]. Experimental Biology and Medicine, 2006, 231: 1459-1467.
[15]  Cheng J Z, Sharma R, Yang Y S, et al . Accelerated metabolism and exclusion of 4-Hydroxynonenal through induction of RLIP 76 and Hgst 5.8 is an early adaptive response of cells to heat and oxidative stress[J]. The Journal of Biological Chemistry, 2001, 276(44): 41213-41223.
[16]  Simon H U, Yehia A H, Schaffer F L. Role of reactive oxygen species (ROS) in apoptosis induction[J]. Apoptosis, 2000, 5(5): 415-418.
[17]  罗佳捷, 吴宗明, 张彬, 等. 金属硫蛋白对热应激奶牛血淋巴细胞凋亡基因和Hsp70基因表达的影响[J]. 草业学报, 2012, 21(4): 244-251. 浏览
[18]  Alessandrra C M V, Danieal C R, Taynara N G F, et al . Immunohiatochemical express of metallothionein in pleomorphic adenoma of minor salivary glands: A role in the control of apoptosis?[J]. Acta Histochemic, 2013, 115(6): 564-568.
[19]  罗琦, 王建华, 王远亮, 等. 金属离子在细胞凋亡中的调控作用[J]. 重庆大学学报, 2003, 26(8): 97-101.
[20]  Wolfgang M. Metallothionein redox biology in the cytoprotective and cytotoxic functions of zinc[J]. Experimental Gerontology, 2008, 43: 363-369.
[21]  Shan Y X, Liu T J, Su H F, et al . Hsp10 and Hsp60 modulate Bcl -2 family and mitochondria apoptosis signaling induced by doxorubicin in cardiac muscle cells[J]. Journal of Molecular and Cellular Cardiology, 2003, 35: 1135-1143.
[22]  Ruchalski K, MaoH, Li Z, et al . Distinct Hsp70 domains mediate apoptosis inducing factor release and nuclear accumulation[J]. The Journal of Biological Chemistry, 2006, 281: 7873-7880.
[23]  Cohen-Saidon C, Carmi I, Keren A, et al . Antiapoptotic function of Bcl -2 in mast cells is dependent on its association with heat shockprotein 90 beta[J]. Blood, 2006, 107: 1413-1420.
[24]  Dutta J, Fan Y, Gupta N, et al . Current insights into the regulation of programmed cell death by NF-kappa B[J]. Oncogene, 2006, 25: 6800-6816.
[25]  Vermeulen L, Vandenb W, Haegeman G. Regulation of NF-kappa B transcriptional activity[J]. Cancer Treatment and Research, 2006, 130: 89-102.
[26]  夏钰弘, 周婧, 常艳华, 等. 肝细胞肝癌组织中NF-κB和Caspase-3的表达及其意义[J]. 中国现代医学杂志, 2012, 22(3): 26-29.
[27]  Dumont A, Hehner S P, Hofmann T G, et al . Hydrogen peroxide induced apoptosis is CD95 independent requires the release of mitochondria derived reactive oxygen species and the activation of NF -kappa B[J]. Oncogene, 1999, 18(3): 747-757.
[28]  Ivanov V, Ronai Z. P38 protects human melanoma cells from UV-induced apoptosis through down regulation of NF-kappa B activity and Fas expression[J]. Oncogene, 2000, 19: 3003-3012.
[29]  Campbell K J, Rocha S, Perkins N D. Active repression of antiapoptotic gene expression by RelA (65) NF-kappa B[J].Molecular Cell, 2004, 13(6): 853-865.
[30]  Henkel G, Krebs B. Metallothioneins: zinc, cadmium, mercury, and copper thiolates and selenolates mimicking protein active site features-structural aspects and biological implications[J]. Chemical Reviews, 2004, 104(2): 801-824.
[31]  Ivan S, Davorka B, Mario S, et al . Role of metallothionein in cadmium traffic and toxicity in kidneys and other mammalian organs[J]. Bio-metals, 2010, 23: 897-926.
[32]  李丽立, 刘云华, 侯德兴, 等. 金属硫蛋白对仔猪抗氧化功能及SOD基因表达的影响[J]. 第四军医大学学报, 2006, 27(19): 1733-1736.
[33]  曹功明, 卢建雄. 锌对动物抗氧化作用的研究进展[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2010, 1: 19-20.
[34]  Wei Y, Michel S, Bernard J, et al . Bcl-w forms complexes with Bax and Bak , and elevated ratios of Bax/Bcl-w and Bak/Bcl-w correspond to spermatogonial and spermatocyte apoptosis in the testis[J]. Molecular Endocrinology, 2000, 14(5): 682-698.
[35]  谢远杰, 石金凤, 赵国军, 等. 热应激对大鼠睾丸 Bcl -2和 Bax 表达的影响[J]. 南华大学学报(医学版), 2010, 38(2): 166-169.
[36]  汪君民, 赵阶祥. 运动热应激对大鼠淋巴细胞凋亡氧化应激机制的影响[J]. 辽宁医学院学报, 2011, 32(2): 105-109, 113.
[37]  贾丹, 昝君兰, 赵宏, 等. 热应激对猪小肠组织形态和细胞凋亡的影响[J]. 北京农学院学报, 2012, 27(1): 36-38.
[38]  宋学立, 钱令嘉, 李凤芝, 等. Bcl -2基因转染对热应激心肌细胞保护作用的机制探讨[J]. 中国应用生理学杂志, 2002, 18(4): 347-349.
[39]  孙忠东, 高尚志, 毛志福, 等. 金属硫蛋白对供心细胞 Bcl -2、 Bax 和 Fas 蛋白表达的影响[J]. 中华实验外科杂志, 2005, 22(3): 375.

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