乙型肝炎病毒调节Pasha启动子活性的初步研究

目的：研究乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus，HBV）对microRNA形成相关因子Pasha表达的调控，并对其作用机制进行初步探讨。方法：用RT-PCR，Westernblot的方法检测HepG2细胞及稳定表达HBV的HepG2-H7细胞中Pasha的表达差异。构建Pasha启动子的萤火虫荧光素酶报告质粒，分别转染HepG2细胞及HepG2-H7细胞，检测HBV对Pasha启动子的影响。将Pasha启动子质粒与HBV4种蛋白的真核表达质粒共转染HepG2细胞，寻找对启动子影响较大的HBV蛋白。结果：RT-PCR和Westernblot的结果显示Pasha在HepG2-H7细胞中的表达较HepG2细胞明显下降。萤火虫荧光素酶活性分析显示HBV能抑制Pasha启动子的活性，且HBx和HBs蛋白对其影响较大。结论：HBV蛋白可以通过抑制Pasha启动子活性调节其在HepG2-H7细胞中的表达。