Wnt3a协同BMP9调控间充质干细胞成骨分化及机制研究

目的：探讨经典Wnt信号通路与骨形态发生蛋白9（Bonemorphogeneticprotein9，BMP9）诱导间充质干细胞（Mes－enchymalstemcells，MSCs）成骨的相互影响及分子机制。方法：以小鼠骨髓来源MSCsC3H10T1/2为目的细胞，用Wnt3a上调经典Wnt信号通路，联合BMP9作用于细胞，通过碱性磷酸酶（Alkalinephosphatase，ALP）活性测定、钙盐沉积实验、realtimePCR、免疫细胞化学染色等方法观测BMP9与经典Wnt信号通路联合后对MSCs成骨分化的影响。结果：Wnt3a明显促进了BMP9诱导的ALP活性的增加[F=264.962，P=0.000；t（BMP9+Wnt3a）-BMP9=7.19，P=0.000；t（BMP9+Wnt3a）-Wnt3a=16.36，P=0.000]，同时也明显增加了成骨标志物骨钙蛋白（Osteocalcin，OC）[F=3920.102，P=0.000；t（BMP9+Wnt3a）-BMP9=39.10，P=0.000；t（BMP9+Wnt3a）-Wnt3a=62.56，P=0.000]和骨桥蛋白（Osteopontin，OPN）[F=1935.824，P=0.000；t（BMP9+Wnt3a）-BMP9=40.88，P=0.000；t（BMP9+Wnt3a）-Wnt3a=56.42，P=0.000]的表达以及Runx2的mR－NA的表达[F=3635.980，P=0.000；t（BMP9+Wnt3a）-BMP9=79.37，P=0.000；t（BMP9+Wnt3a）-Wnt3a=86.96，P=0.000]，并且还促进了钙盐沉积。结论：Wnt3a与BMP9相互协同诱导MSCs的骨向分化，其中成骨转录因子Runx2可能作为二者的交汇点起了重要作用。