全反式维甲酸诱导肝前体细胞向肝细胞分化的研究

目的：探讨全反式维甲酸（All-transretinoicacid，ATRA）对肝前体细胞分化的影响。方法：取孕14.5d胎鼠制备肝前体细胞，瞬时转染带白蛋白启动子（Albuminpromoter）的荧光素酶报告质粒pALB-Luc，以便实时检测细胞的分化状态。优化ATRA诱导条件，分别于诱导后3、6、9d收集细胞总RNA，半定量RT-PCR检测分化相关指标的变化。并于诱导后11d用苏木精-伊红染色法观察细胞形态的改变，PAS染色观察细胞的分化成熟程度。结果：ATRA浓度为1μmol/L时对肝前体细胞分化诱导作用最强。与对照组相比，随培养时间的延长，ATRA组分化早期指标膜蛋白（Deltalike，DLK）、细胞角蛋白（Cytokeratin19，CK19）表达降低更为明显，而甲胎蛋白（Alphafetalprotein，AFP）、白蛋白（Albumin，ALB）表达更为升高。形态学观察细胞体积增大，呈多边形，核浆比率降低，相嵌紧密排列，可见双核细胞。PAS染色阳性率上升。结论：浓度1μmol/L的ATRA对肝前体细胞分化诱导作用最强，ATRA能诱导肝前体细胞分化为类肝细胞。