诊断用苛求芽孢杆菌尿酸酶的剂型与储存方法

目的：考察重组苛求芽孢杆菌尿酸酶作为诊断试剂的剂型和储存方法。方法：将此重组尿酸酶制成干粉和液体剂型于-18℃和4℃储存，定期测定酶活性；在干粉制剂时加入保护剂于-18℃储存，在液体制剂时加入防腐剂于4℃储存，间隔适当时间监测酶活性。聚丙烯酰胺凝胶电泳分离此尿酸酶四聚体和二聚体，染色检测蛋白和酶活性。结果：此尿酸酶干粉和液体制剂在4℃储存28d后对应的剩余酶活性分别为12%和100%，在-18℃冻存28d后对应的剩余酶活性分别为24%和92%。在干粉制剂时加海藻糖、蔗糖或甘露醇作为保护剂于-18℃储存56d后，剩余酶活性对应分别为100%、76%和43%。加叠氮钠或苯甲酸的液体制剂，在4℃储存56d后对应的剩余酶活性分别为99%和82%。在-18℃储存至无活性的冻干粉制剂经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，发现此尿酸酶主要以无活性二聚体存在而活性四聚体很少。结论：此尿酸酶作为诊断试剂，可加入叠氮钠制成液体剂型在4℃储存。