Survivin与VEGF基因反义寡核苷酸联合应用人肺腺癌A549细胞作用研究

目的：探讨脂质体介导的血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）与生存素（Survivin）基因反义寡核苷酸联合应用对人肺腺癌细胞系A549生长的影响。方法：构建VEGF与Survivin基因反义寡核苷酸，以脂质体转染人肺腺癌A549细胞。实验分为对照组、脂质体对照组、VEGF反义转染组（VEGFASODN组）、Survivin反义转染组（SurvivinASODN组）、联合转染组（VEGFASODN+SurvivinASODN组）。采用RT-PCR检测VEGF与Survivin基因表达；流式细胞仪分析细胞周期和凋亡、检测VEGF与Survivin蛋白表达；MTT观测细胞生长；平板集落实验分析细胞增殖克隆能力。结果：脂质体介导的VEGF与Survivin基因反义寡核苷酸联合转染组A549细胞存活率和增殖克隆能力明显低于其余组，差异有统计学意义（P=0.043，P=0.049，P=0.038，P=0.023）。流式细胞仪分析显示联合转染组细胞周期被阻滞，Survivin蛋白表达低于其余组，与对照组差异有统计学意义（P=0.017，P=0.002），VEGF蛋白表达低于其余组，与对照组差异有统计学意义（P=0.013，P=0.003）。RT-PCR检测结果显示联合转染组VEGF与Survivin基因表达低于其余组。结论：VEGF与Survivin基因反义寡核苷酸联合应用抑制人肺腺癌A549细胞的增殖，延长细胞周期，抑制VEGF与Survivin基因表达。为后续的动物实验打下了理论依据。