单胺氧化酶抑制药物体外筛选模型的建立

目的：构建一种能用于治疗神经退行性变疾病单胺氧化酶（monoamineoxidase，MAO）抑制药物的体外筛选模型。方法：采用紫外分光光度方法，以苄胺或5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）分别作为MAO-B或MAO-A的反应底物，测定其活性，并对MAO浓度、底物浓度、缓冲液浓度、pH值、反应时间和温度等进行优化。结果：研究确定的模型反应体系条件为：在温度37℃、酶预孵育时间20min和反应时间60min下，测定MAO-B活性最佳条件为100mmol/L磷酸钾缓冲液（pH7.6），MAO和底物苄胺的终浓度分别为0.15mg/ml和2.00mmol/L；测定MAO-A活性最佳条件为100mmol/L磷酸钾缓冲液（pH7.4），MAO和底物5-HT的终浓度分别为0.40mg/ml和5.00mmol/L。结论：建立了一种MAO抑制药物体外筛选的模型，该模型具有成本低、操作简便等特点，适合于大规模筛选MAO-B和MAO-A的抑制药物。