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ISSN: 2333-9721
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Ang-2在胃癌中的表达及其反义基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响

Keywords: 新生血管形成,促血管生成素-2,反义真核表达载体,人胃癌细胞株,基因转染

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目的:探讨促血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤病理分期的联系;观察反义Ang-2基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响。方法:用WesternBlot法检测Ang-2蛋白在10例胃癌组织及10例正常胃组织中的表达,用免疫组化法检测53例不同病理分期的胃癌组织中Ang-2蛋白的表达;应用脂质体转染法将既往实验合成[1]的pEGFP-N1-antiAng-2转染体外培养的人胃癌细胞SGC-7901,以空载体(pEGFP-N1)转染组和未转染组作对照,RT-PCR及免疫组化检测转染后Ang-2基因及蛋白的表达,MTT法和流氏细胞术检测反义Ang-2基因转染对细胞生长和细胞调亡的影响;分别用上述三组细胞注射于裸鼠皮下,对比观察肿瘤生成的速度和肿瘤组织中的血管生成数量。结果:Ang-2蛋白在正常胃组织中不表达,在胃癌组织中呈阳性表达,并且随病理分期进展表达呈增强趋势;RT-PCR及免疫组化显示反义Ang-2基因转染组无Ang-2mRNA及Ang-2蛋白的表达,MTT法检测显示反义Ang-2基因转染组活细胞数较其它两组均低(P<0.05),流氏细胞术检测显示其调亡率较其它两组明显增高(P<0.01);转染了反义Ang-2基因的胃癌细胞成瘤速度较其它两组明显减慢(P<0.05),肿瘤组织中血管生成的数量较其它两组明显减少(P<0.05)。结论:胃癌组织中Ang-2的表达与胃癌血管生成及胃癌侵袭能力密切相关;反义Ang-2基因转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901中Ang-2mRNA及Ang-2蛋白的表达,抑制其体外生长,促进其凋亡;并对其体外成瘤性及其新生血管的生成有明显的抑制作用。

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