载肝癌细胞GPC3抗体的纳米级脂质超声微泡制备及体外寻靶研究

目的：探索制备载肝癌细胞磷酯酰肌醇蛋白多糖-3（glypican-3，GPC3）抗体的新型纳米级脂质超声微泡造影剂的方法，并评价其体外对肝癌细胞的靶向结合效果。方法：以机械振荡法制备纳米级脂质微泡，并通过光学显微镜及电子显微镜检测纳米微泡大小形态、粒径分布；生物素-亲和素桥接肝癌细胞GPC3抗体与纳米级脂质超声微泡，流式细胞仪检测微泡与抗体结合效率；免疫组化检测常见3种肝癌细胞的GPC3阳性表达；微泡体外与肝癌细胞靶向结合，激光共聚焦显微镜检测寻靶效果。结果：纳米脂质微泡呈圆形，分布均匀，无明显聚集，粒径范围约350~450nm。微泡与抗体结合效率达85.05%，人SMMC-7721、HepG2及Huh7肝癌细胞GPC3表达阳性，激光共聚焦显微镜显示载GPC3抗体纳米级脂质微泡可与肝癌细胞特异性结合。结论：本研究成功制备了具备靶向性的新型纳米级脂质超声微泡，生物素-亲和素桥接GPC3抗体可特异性结合肝癌细胞，达到靶向性识别效果，为微泡的靶向诊断及治疗研究奠定了基础。