病毒及非病毒载体对U937单核细胞的转染效果

目的：比较研究腺病毒、慢病毒和Lipofectamine20003种方法转染U937细胞的效果差异，以寻找一种简便、高效转染U937细胞的方法。方法：分别采用Lipofectamine2000介导质粒载体（pGPHI/GFP/Neo），腺病毒（Adv-GFP-NC）和慢病毒（LV-GFP-NC）3种方法转染U937细胞，于脂质体转染48h后、腺病毒和慢病毒转染96h后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白（greenfluorescenceprotein，GFP）表达情况，并收集细胞以流式细胞仪检测GFP阳性细胞的比例。台盼蓝染色法计数不同转染方法对细胞活力的影响。结果：Lipofectamine2000介导质粒载体转染组、腺病毒转染组GFP阳性细胞极少，流式细胞仪检测GFP阳性细胞均＜4%；慢病毒转染组GFP阳性细胞满视野，感染复数=100时，GFP阳性细胞约占90%。台盼蓝染色法显示腺病毒、慢病毒组活细胞率明显高于脂质体组，差异具有统计学意义（P<0.01）。结论：慢病毒不仅使Lipofectamine2000和腺病毒能有效地将外源基因导入U937细胞内表达，也是转染U937细胞的理想载体。